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Una introducción a los factores que afectan a la resolución de una columna cromatográfica

Jan 28, 2022

Los factores que afectan la resolución de una columna cromatográfica son el tipo y las propiedades de la fase estacionaria (tamaño de partícula, distribución del tamaño de partícula, etc.), las condiciones de embalaje, la longitud de la columna, el tipo y el caudal de la fase móvil, y las propiedades de las sustancias utilizadas para medir la eficiencia de la columna. detalles como sigue:


(1) La longitud cromatográfica y las propiedades del relleno, cuanto más larga sea la columna cromatográfica, mejor será el análisis entre los componentes, pero cuanto más larga sea la columna cromatográfica, mayor será la caída de presión y la presión de entrada es limitada. Si la columna es demasiado larga, la relación de presión de entrada y salida aumentará, lo que afectará la separación de los picos cromatográficos;


(2) El tamaño de partícula del empaquetamiento de columnas cromatográficas es también el factor principal. Cuanto más finas sean las partículas, mejor será la resolución debido al aumento en el área de superficie, pero las partículas más finas aumentarán la caída de presión de la columna, lo que también tendrá un efecto adverso;


(3) La temperatura de la columna también tiene una gran influencia en el análisis del cromatógrafo de líquidos, porque la solubilidad del gas en el líquido o el grado de adsorción en la superficie sólida disminuye con el aumento de la temperatura. En el análisis cromatográfico gas-líquido, cuando la temperatura supera una cierta temperatura, los líquidos estáticos generalmente se evaporan de la columna, por lo que se debe considerar el punto de ebullición de la muestra al elegir la temperatura de la columna. Generalmente, es ligeramente inferior al valor medio del punto de ebullición de la muestra;


(4) La influencia del tipo de gas portador del cromatógrafo de gases. Los gases portadores comúnmente utilizados son N2, H2, He, Ar, etc. Entre ellos, el peso molecular del gas H2 y He es pequeño, lo que es propicio para mejorar la velocidad de análisis, pero el medio con mayor concentración es fácil de formar difusión en él, lo que afecta el grado de separación, por lo que en la medición real los gases H2 y He medio se utilizan generalmente en áreas con baja concentración media y aumentan su caudal para reducir la influencia de la difusión. Las ventajas de los gases con pesos moleculares mayores como N2 y Ar son que el efecto de difusión es pequeño, y la desventaja es que la caída de presión en la columna es grande y el caudal es lento, es decir, el período de análisis es largo;


(5) Influencia del caudal de gas portador. El tiempo de residencia del medio en la fase estacionaria depende principalmente de las características del propio medio (volatilidad, polaridad, etc.) y del caudal del gas portador. Por lo tanto, la velocidad del caudal afecta directamente el grado de separación;


(6) La influencia del tiempo de inyección y el volumen de inyección. El tiempo de inyección debe ser lo más corto posible. En principio, la inyección instantánea mejorará la resolución. El volumen de inyección debe ser lo más pequeño posible, pero debe ser identificable por el detector.


Por lo tanto, la mejora de la resolución de la columna cromatográfica se puede lograr aumentando la longitud de la columna, reduciendo el volumen de inyección, reduciendo la tasa de flujo de gas portador, disminuyendo la temperatura de la columna cromatográfica, aumentando la temperatura de la cámara de vaporización y reduciendo el volumen muerto del sistema.


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